DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中最重要、最基本的操作之一。我公司提供從各種不同來源的樣品（如細(xì)菌、真菌、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
一 基本步驟：
1、樣品預(yù)處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——勻漿、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
注意：客戶最好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
2、細(xì)胞裂解
● CTAB法
CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化銨）是一種陽(yáng)離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，通過有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。此法多用于植物組織、真菌等材料。
● SDS法
SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、細(xì)菌、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法
物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
3、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，最后用TE溶解DNA沉淀。
4、DNA的定量及檢測(cè)
● 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度
DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。
提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
二、價(jià)格.實(shí)驗(yàn)周期
| 服務(wù)項(xiàng)目 | 樣品要求 | 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) | 實(shí)驗(yàn)周期 |
| 細(xì)胞基因組DNA提取 | 細(xì)胞用量：1x10（4次方）—1x10（6次方）個(gè)，新鮮培養(yǎng)（1-2天） | 80元/樣品 | 3個(gè)工作日 |
| 組織基因組DNA提取 | 組織用量：25mg，新鮮標(biāo)本或液氮凍存的標(biāo)本 | 80元/樣品 | 3個(gè)工作日 |
| 血液基因組DNA提取 | 血液用量：5ml，新鮮或液氮凍存的標(biāo)本 | 100元/樣品 | 5個(gè)工作日 |
| 菌液基因組DNA提取 | 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的新鮮菌液1～2ml | 80元/樣品 | 3個(gè)工作日 |
*以上實(shí)驗(yàn)周期是針對(duì)正常實(shí)驗(yàn)樣品制定的，樣品特殊或樣品多時(shí)除外。
提供結(jié)果
包括基因組DNA的瓊脂糖凝膠電泳圖、OD值測(cè)定結(jié)果、基因組DNA的濃度及總含量。
